Diretrizes para Submissão de Amostras
Ver Estrutura e Localização de Marcadores no Mesmo Contexto de Pesquisa
A histologia e a imuno-histoquímica respondem a questões complementares. A coloração H&E revela a morfologia geral e a organização dos tecidos: se o modelo forma arranjos epiteliais esperados, estruturas luminais, regiões em camadas, áreas estromais, zonas necróticas ou outras características relevantes para o estudo. A IHC localiza antígenos selecionados em secções de tecido através de um sinal cromogénico que pode ser analisado em conjunto com a morfologia. A IF utiliza marcadores fluorescentes para distinguir alvos selecionados, examinar a co-localização e, com uma preparação e estratégia de imagem adequadas, preservar mais informações espaciais numa secção ou amostra tridimensional intacta.
Os métodos tornam-se mais úteis quando estão ligados a uma decisão definida. Um projeto pode perguntar se um modelo mantém uma arquitetura associada a uma fonte, se um marcador de linhagem está presente no compartimento esperado, se um tratamento altera um marcador de estado pré-definido ou se diferentes passagens mostram uma organização consistente. Traduzimos essa questão em um plano de comparação antes de começar a coloração.
Esta página aborda a evidência de marcadores proteicos focados como parte da caracterização de organoides. Não transforma a imuno-coloração em um serviço de perfilagem proteica não direcionada. Se a principal incerteza for uma população celular desconhecida, um programa de expressão amplo ou um estado molecular resolvido espacialmente, o nosso serviços de sequenciação de organoides pode fornecer um passo seguinte mais apropriado. Para projetos que exigem vários módulos interligados, o solução de pesquisa em organoides trabalho de modelagem de coordenadas, caracterização, sequenciação e interpretação.
Escolha a Rota de Preparação Antes da Coloração
A decisão técnica mais importante muitas vezes ocorre antes de a primeira mancha ser aplicada. A fixação, o manuseio da matriz, a inclusão, a orientação, a espessura das secções, a permeabilização e a montagem determinam quais estruturas permanecem visíveis e se os anticorpos conseguem alcançar os seus alvos. Um método que é bem adequado para a morfologia de rotina pode não ser o melhor caminho para um antigénio frágil ou uma questão de localização tridimensional.
Secções de Parafina
A preparação fixada em formalina e embebida em parafina é útil quando o projeto necessita de blocos estáveis, seções seriadas, morfologia H&E familiar e revisão repetível através de múltiplos marcadores. É frequentemente uma abordagem prática para a comparação lado a lado de organoides e tecido fonte ou de referência compatível. A orientação e a estratégia de embebição são importantes porque pequenos organoides podem ser perdidos, dobrados, comprimidos ou seccionados para fora da região de interesse.
Melhor para: revisão convencional de H&E, IHQ em secções seriadas, estudos baseados em blocos arquivados e projetos que priorizam a morfologia das secções.
Não é automaticamente o melhor paraantígenos que são sensíveis à fixação ou recuperação de antígenos, estudos que requerem um contexto tridimensional intacto, ou amostras cuja arquitetura é facilmente distorcida durante o processamento.
Criosecções
A preparação congelada pode encurtar o caminho desde a fixação até o corte e pode preservar antígenos selecionados ou proteínas fluorescentes melhor do que o processamento em parafina. Também pode ser útil quando o plano de pesquisa inclui IF e a morfologia pode ser interpretada em criocortes. No entanto, o congelamento e o corte podem introduzir rasgos, dobras, artefatos de cristais de gelo ou morfologia variável, particularmente em organoides delicados ou matrizes mal suportadas.
Melhor para: necessidades de preservação de antígenos selecionados, IF baseada em seções e projetos em que sinais fluorescentes compatíveis são importantes.
Não é automaticamente o melhor paraestudos que requerem morfologia de qualidade de parafina, manuseio de blocos a longo prazo ou seções seriadas com arquitetura altamente consistente.
Imunofluorescência em Montagem Total
A IF em montagem completa preserva o organoide intacto e pode revelar como marcadores selecionados estão distribuídos através de uma estrutura tridimensional. Pode suportar a aquisição em z-stack, secionamento óptico e renderização tridimensional quando o tamanho do organoide, as propriedades ópticas, a penetração de anticorpos, a clarificação e a capacidade de imagem são compatíveis. O mesmo contexto tridimensional também cria constrangimentos técnicos: matriz extracelular residual, tecido denso, permeabilização inadequada, penetração limitada de anticorpos e sinal de fundo podem produzir um gradiente aparente que é metodológico em vez de biológico.
Melhor pararelações espaciais intactas, questões de localização tridimensional selecionadas e visualização que não pode ser reconstruída de forma fiável a partir de um pequeno número de secções.
Não é automaticamente o melhor paraamostras grandes ou opticamente densas sem uma estratégia de penetração e desobstrução validada, revisão rotineira de alto rendimento ou projetos que necessitam de morfologia H&E convencional na mesma amostra intacta.
A seleção de rotas é finalizada após a revisão de viabilidade. Em alguns projetos, alíquotas correspondentes são preparadas através de diferentes rotas, de modo que a arquitetura H&E, as evidências de marcadores baseadas em seções e as informações espaciais de montagem total possam ser interpretadas em conjunto. Isso não significa que cada organoide deva passar por todos os métodos. Cada rota é incluída apenas quando contribui com evidências que alteram a decisão de pesquisa.
Construa um Painel de Marcadores em Torno da Questão Biológica
Uma lista longa de marcadores não é automaticamente um painel forte. A seleção de marcadores começa com a identidade celular, estado de diferenciação, compartimento estrutural, estado de proliferação, resposta ao stress ou componente do microambiente que o estudo precisa avaliar. Revisamos a localização esperada de cada alvo, informações disponíveis sobre anticorpos, compatibilidade de espécies hospedeiras e fluoróforos, controles de tecido e organoides, e o método de preparação antes que o painel seja confirmado.
Um painel prático frequentemente contém vários papéis em vez de várias versões da mesma evidência:
- Marcadores de identidade testar se uma linhagem ou tipo celular selecionado está representado.
- Marcadores de diferenciação ou maturação abordar um estado de desenvolvimento ou funcional definido.
- Marcadores estruturais localizar características epiteliais, estromais, da membrana basal, de junção ou associadas à polaridade.
- Marcadores de estado avaliar um processo pré-definido como proliferação, apoptose, hipoxia ou stress dentro dos limites dos alvos selecionados.
- Marcadores do microambiente localizar componentes estromais ou imunes selecionados em modelos de co-cultura ou assembloide.
- Manchas de referência ou contramanchas coloque o sinal alvo dentro de um contexto tecidual ou nuclear reconhecível.
Nenhum painel de marcadores universal pode estabelecer que cada organoide é fiel à sua origem ou adequado para todas as aplicações subsequentes. A expressão de marcadores pode variar com o tipo de organoide, passagem, maturação, condições de cultura, tratamento e manuseio da amostra. Um sinal positivo indica que o alvo selecionado foi detectado nas condições testadas; não fornece um inventário imparcial dos estados celulares. Um sinal negativo pode refletir a biologia, mas também pode resultar de fixação, recuperação, penetração, compatibilidade de anticorpos ou configurações de imagem. É por isso que o painel e os controles são revistos em conjunto.
Os Controles Fazem Parte do Design do Ensaio
Os controlos são selecionados de acordo com a afirmação que o estudo precisa de apoiar. Podem incluir um material positivo conhecido, um controlo negativo apropriado ou de omissão, um organoide não tratado ou de referência, um tecido de origem ou de referência correspondente, um lote de cultura independente ou uma comparação entre passagens ou condições. Para IF multiplex, podem ser necessários controlos de coloração única e revisão de canais para distinguir a co-localização biológica de sobreposições espectrais ou artefatos de processamento de imagem.
O relatório regista quais os controlos que foram utilizados e o que permitem ao revisor concluir. Quando um controlo adequado não está disponível, essa limitação é identificada antes de o projeto avançar, em vez de ser ocultada após a imagem.
De Revisão de Amostra a um Conjunto de Imagens Rastreáveis
O nosso fluxo de trabalho conecta os passos do laboratório com a interpretação final, de modo que um revisor possa rastrear uma imagem de volta ao modelo, condição, secção, coloração e regra de análise.
- Revisão de questão de pesquisa e comparação. Definimos a característica a ser avaliada, a unidade biológica, os grupos de comparação, as passagens ou lotes relevantes, e a decisão que seguirá a partir do resultado.
- Avaliação de material e metadados. Revisamos o tipo de organoide, matriz de cultura, condição, estado de preservação, fixação anterior, controles disponíveis, marcadores-alvo e quaisquer ensaios subsequentes planeados.
- Seleção de rota de preparação. A secção em parafina, a criosecção, a IF em montagem total ou uma combinação definida pelo projeto é selecionada de acordo com a morfologia, antigénio, penetração, orientação, profundidade de imagem e restrições de material.
- Otimização de piloto e condições onde necessário. Um piloto limitado pode avaliar a recuperação, fixação, recuperação, diluição de anticorpos, bloqueio, permeabilização, exposição ou fundo antes de processar o conjunto completo de amostras.
- Incorporação, secção ou preparação em montante inteiro. As amostras são tratadas com um plano de orientação e recuperação apropriado para pequenas estruturas tridimensionais. Os registos de processamento ligam cada preparação ao seu identificador de origem.
- Coloração H&E, IHC e/ou IF. Os painéis e controlos confirmados são processados utilizando a rota acordada. Os desenhos de multiplex são verificados quanto à compatibilidade de anticorpos e canais antes da corrida final.
- Imagens e revisão de qualidade. Os campos, regiões, ampliação, canais e configurações de aquisição são selecionados de acordo com a comparação. O foco, a exposição, o fundo, a integridade do tecido e o comportamento de controlo são revistos antes da análise quantitativa.
- Análise de imagem definida pelo projeto. Quando solicitado e viável, um conjunto de regras documentadas é aplicado à área, intensidade, contagens, co-localização, distribuição espacial ou outra métrica predefinida.
- Relatório e transferência de dados. O entregável liga as descobertas representativas, ficheiros de imagem, anotações, tabelas de análise, métodos, controlos e limitações ao design original do projeto.
Este fluxo de trabalho é modular. Uma comparação simples de H&E não necessita de cada passo de otimização, enquanto um estudo de IF em montagem total multiplex pode exigir um piloto antes que o painel completo seja processado. O âmbito do projeto é concebido para reduzir o consumo de amostras evitáveis sem prometer que cada alvo funcionará sob uma única condição universal.
Informação sobre Amostras e Projetos Necessária
As quantidades exatas, recipientes, condições de preservação e instruções de envio são confirmados após a revisão de viabilidade, uma vez que os requisitos dependem do tamanho do modelo, formato da cultura, via de preparação, painel de marcadores e número de comparações.
| Material ou informação | Por que é importante | Questões revisadas antes do início do trabalho |
|---|---|---|
| Organoides cultivados ou fixos | Define o material experimental principal. | Tipo de organoide, fonte, matriz, intervalo de tamanho, passagem, lote, condição, viabilidade ou estado de fixação |
| Blocos, secções ou diapositivos | Pode permitir a coloração sem repetir o processamento a montante. | Fijador, meio de inclusão, tipo de secção, idade, armazenamento, orientação, revestimento de lâmina, corantes anteriores |
| Material de referência ou fonte correspondente | Suporta uma comparação estrutural direta ou de marcador quando cientificamente apropriado. | Identificadores correspondentes, composição do tecido, compatibilidade de preservação, disponibilidade, comparação pretendida |
| Organoides de controlo ou condição basal | Ajuda a separar a variável de estudo dos efeitos culturais e de manipulação. | Tipo de controlo, processamento concorrente, relação em lote, replicação biológica |
| Informação sobre marcadores e anticorpos | Determina a viabilidade do painel e as necessidades de otimização. | Alvo, localização esperada, reatividade com espécies, clone, hospedeiro, conjugado, validação prévia, compatibilidade de multiplex. |
| Imagens existentes ou resultados de piloto | Revela problemas de morfologia, fundo ou localização antes do processamento completo. | Método de aquisição, ampliação, canais, exposição, anotações, artefatos observados |
| Plano de sequenciação a jusante | Previne que escolhas de fixação ou alocação comprometam trabalhos moleculares posteriores. | Tipo de ensaio, alíquotas correspondentes, ponto de tempo de recolha, metadados necessários, compatibilidade de preservação |
Se os organoides ainda estão a ser estabelecidos ou expandidos, o nosso serviços de desenvolvimento de modelos organoides pode coordenar marcos culturais com o futuro ponto de coleta de histologia. Isso evita selecionar um trecho ou condição de coleta após a amostra já ter sido consumida.
A Quantificação de Imagem É Definida Antes de Ser Calculada
A quantificação pode tornar uma comparação mais consistente, mas apenas quando a métrica, a unidade biológica, a regra de amostragem, a abordagem de segmentação e os critérios de exclusão são definidos previamente. Um valor percentual ou de intensidade não é autoexplicativo. Depende de como a fronteira do organoide foi identificada, quais regiões foram amostradas, como o fundo foi tratado e se múltiplos campos representam um organoide, um poço ou material biológico independente.
Dependendo do projeto e da qualidade da imagem, os resultados podem incluir:
- área positiva ou fração de sinal dentro de uma região definida;
- intensidade do sinal média, mediana ou integrada após uma regra de fundo documentada;
- contagens de objetos ou células-alvo positivas usando segmentação definida pelo projeto;
- distância, compartimento ou medições de distribuição radial;
- métricas de sobreposição ou co-localização para canais pré-definidos;
- resumos a nível de organoides através de passagens, lotes ou condições;
- painéis de revisão anotados ligando valores quantitativos à imagem subjacente.
Não utilizamos um limiar universal em marcadores, tecidos ou configurações de aquisição não relacionados. Os limiares e as regras de segmentação são testados em imagens representativas e controlos, sendo mantidos consistentes dentro da comparação acordada sempre que possível. Se a qualidade da coloração, danos na secção, autofluorescência, saturação ou penetração desigual tornarem uma métrica não fiável, a medição afetada é sinalizada em vez de convertida numa afirmação biológica confiante.
A bioinformática convencional não é o núcleo deste serviço. O componente analítico é a análise de imagem digital ligada ao experimento de coloração. Quando a questão de pesquisa requer uma análise de estado celular em nível de descoberta ou uma interpretação em toda a transcriptoma, o projeto deve avançar para sequenciação em vez de tratar um painel de coloração maior como um substituto.
O que Recebe
Os entregáveis são definidos antes do processamento e podem ser ajustados ao âmbito confirmado. Um projeto pode incluir:
- um mapa de amostra e comparação;
- registos de preparação, coloração e método de imagem;
- Visão geral de H&E e imagens selecionadas com maior ampliação;
- Conjuntos de imagens IHC ou IF com canais ou vistas compostas conforme acordado;
- notas de qualidade específicas para o controlo, revisão e ensaio;
- regiões representativas anotadas;
- tabelas e gráficos quantitativos definidos pelo projeto quando incluídos;
- um resumo de conclusões que separa observações de interpretações;
- limitações e recomendações para coloração repetida, outra rota de preparação ou sequenciação posterior;
- ficheiros de imagem brutos e processados acordados.
O relatório não reduz a qualidade do modelo a uma pontuação universal de aprovação/reprovação. Indica quais características predefinidas foram observadas, quais comparações foram suportadas e quais questões permanecem não resolvidas. Isso torna o resultado útil para a pessoa que encomendou o estudo, o cientista que o revisa e a equipa de sequenciação que pode receber material correspondente mais tarde.
Quando a Histologia é Suficiente—e Quando o Sequenciamento Adiciona Valor
A histologia e a imuno-coloração são escolhas fortes quando os alvos estão pré-definidos e a localização é importante. Elas podem mostrar se um marcador está localizado em um compartimento esperado, se as estruturas selecionadas estão preservadas e se uma condição planeada está associada a uma alteração visível. Não são inquéritos imparciais de todos os tipos celulares, vias ou estados moleculares.
| Questão de pesquisa | Papel da histologia/imunocoloração | Quando outro método é mais apropriado |
|---|---|---|
| O organoide apresenta a arquitetura esperada? | H&E pode documentar a estrutura e características morfológicas selecionadas. | Adicione sequenciação quando programas moleculares, e não estruturas visíveis, orientam a decisão. |
| Está presente e localizado um marcador de linhagem ou estado pré-definido? | IHC ou IF podem testar o alvo selecionado no contexto do tecido. | Utilize sequenciação de RNA de célula única ou de núcleo único quando as populações celulares não forem conhecidas de antemão. |
| Os dois marcadores selecionados ocupam a mesma região? | O IF multiplexado pode suportar a análise de co-localização ou distribuição espacial. | Utilize a transcriptómica espacial quando programas moleculares mais amplos devem ser mapeados em contexto. |
| As fontes e os organoides são semelhantes em todos os níveis biológicos? | A histologia contribui com evidências estruturais e de proteínas direcionadas. | Nenhuma única coloração pode estabelecer fidelidade global; combine com evidência genética ou transcriptómica conforme necessário. |
| O tratamento ou a passagem alteraram uma característica conhecida? | Um painel de manchas controladas pode comparar a característica pré-definida. | Utilize um ensaio molecular mais abrangente quando o mecanismo ou o estado celular afetado for desconhecido. |
O serviços de caracterização de organoides a página ajuda a selecionar evidências em morfologia, marcadores, genética e prontidão para sequenciação. Esta página de histologia trata da preparação de tecidos, H&E, IHC, IF, imagem e componente de relatório como um pacote.
Formatos de Resultados Ilustrativos
Os seguintes visuais planeados explicam estruturas comuns de entregáveis. São exemplos ilustrativos, não dados de clientes e não reivindicações de desempenho.
Comparação de Arquitetura H&E
Um painel emparelhado pode colocar material de fonte ou referência ao lado de seções de organoides em visão geral e em ampliação selecionada. A anotação acompanhante identifica as características estruturais analisadas, a orientação e qualquer artefato de processamento que limite a comparação. Uma aparência semelhante é descrita apenas para as seções e características testadas.
Localização de Marcadores IHC
Um painel de marcadores cromogénicos pode combinar uma contra-coloração que preserva a morfologia com um antigénio definido pelo projeto. Regiões representativas estão ligadas ao comportamento de controlo e, quando incluídas, a uma regra consistente de contagem de área positiva ou de objetos. A saída mostra onde o alvo selecionado foi detetado; não implica um inventário completo dos tipos celulares.
SE Co-localização e Contexto Tridimensional
Um painel de IF multicanal pode mostrar núcleos e marcadores selecionados como canais individuais e compósitos. A IF baseada em secções suporta a revisão de compartimentos, enquanto a aquisição em montagem total pode adicionar z-stacks ou renderização tridimensional quando as condições de penetração e ópticas são adequadas. A co-localização é interpretada utilizando as regras de imagem e análise acordadas, não apenas pela sobreposição visual.
FAQs sobre Histologia de Organoides e Imunotintura
Devo escolher H&E, IHC ou IF para o meu estudo de organoides?
Escolha de acordo com a questão. H&E é adequado para a morfologia e arquitetura geral. A IHC localiza alvos pré-definidos numa secção com um sinal cromogénico. A IF suporta a localização multicanal e, com a preparação adequada, a imagiologia tridimensional. Um projeto pode combiná-los quando cada método responde a uma incerteza distinta.
Pode o mesmo organoide ser utilizado para H&E, IHC, IF e sequenciação?
Não costuma ser um único espécime físico, uma vez que a fixação, incorporação, coloração em montagem total, extração de ácidos nucleicos e sequenciação requerem diferentes rotas de preparação. Organoides ou alíquotas correspondentes devem ser coletados a partir de pontos de cultura alinhados e rastreados sob o mesmo mapa de amostras.
Oferecem imunofluorescência em montagem total?
A IF em montagem total pode ser considerada quando o organoide, alvo, matriz, tamanho da amostra, penetração do anticorpo, clareamento óptico e plano de imagem são compatíveis. A viabilidade é revista antes de ser prometida, e um piloto pode ser recomendado para um novo modelo ou combinação de anticorpos.
Posso submeter os meus próprios anticorpos?
Os anticorpos especificados pelo cliente podem ser revistos quanto à relevância do alvo, reatividade com espécies, informações sobre clones, espécie hospedeira, conjugação, uso anterior e compatibilidade em multiplex. A aceitação e o âmbito de otimização dependem das evidências disponíveis, dos controlos e do material da amostra.
Consegue criar um painel de marcadores padrão para qualquer tipo de organoide?
Não existe um painel universal que estabeleça a fidelidade para cada organoide. Construímos um painel focado em torno do modelo, expectativa biológica, comparação e conclusão pretendida. Os marcadores suportados pela literatura ainda requerem uma revisão de compatibilidade para a preparação e condições do ensaio submetidas.
A coloração pode provar que um organoide é totalmente equivalente ao seu tecido de origem?
Não. A histologia e a imunocoloração avaliam características estruturais e a nível de proteínas selecionadas no material testado. Elas não estabelecem equivalência global em termos genéticos, transcriptómicos, epigenéticos, funcionais ou de composição celular.
Consegue quantificar imagens de IHC ou IF?
Sim, quando a qualidade da imagem e o desenho do estudo suportam uma métrica defensável. A unidade biológica, a regra de seleção de campo, a abordagem de segmentação, o limiar, o tratamento do fundo e as exclusões devem ser definidos para que o número possa ser rastreado até a imagem subjacente.
Quais são as causas de um fundo elevado ou sinal fraco na IF de organoides?
Os possíveis contribuintes incluem fixação, mascaramento de antígenos, compatibilidade de anticorpos, bloqueio insuficiente, autofluorescência, matriz residual, permeabilização incompleta, penetração limitada de anticorpos, lavagem, montagem e configurações de aquisição. Controles e um piloto focado ajudam a distinguir esses fatores técnicos da biologia.
Consegue comparar diferentes passagens, lotes ou tratamentos?
Sim, quando os grupos são definidos antes do processamento e as unidades biológicas são apropriadas. O passage, lote, condição, tempo de recolha, via de preparação e configurações de aquisição devem ser equilibrados ou documentados para que não sejam confundidos com o efeito biológico primário.
Que informações devo fornecer para uma análise de viabilidade?
Forneça o tipo de organoide e fonte, matriz de cultura, passagem e lote, questão de pesquisa, grupos de comparação, material disponível, estado de preservação, marcadores-alvo, informações sobre anticorpos, imagem ou quantificação desejada, controlos e qualquer plano de sequenciação subsequente.
Estudo de Caso: H&E, IHC e IF Resolvem Características Complementares em Assembloides de Câncer de Pulmão
Fonte. Zhang e colegas relataram um estudo independente em 2024 em Comunicações da Natureza descrevendo um modelo de pesquisa de assembloide de cancro do pulmão específico do paciente. O trabalho não envolveu a CD Genomics e é apresentado aqui apenas como um exemplo publicado de como as evidências de imagem complementares podem ser organizadas.
Questão de pesquisa. Os investigadores perguntaram se os assembloides gerados a partir de organoides de cancro do pulmão e células do microambiente tumoral mantinham características histológicas e celulares selecionadas dos tumores de origem. A comparação exigiu mais do que um tipo de imagem, uma vez que a arquitetura, os marcadores epiteliais, os componentes estromais e a localização das células imunes não são medidos por uma única coloração.
Métodos. Figura 3 imagens combinadas de H&E de assembloides e tumores fonte correspondentes com imagens baseadas em marcadores. O estudo examinou a expressão de CK7 e EpCAM e utilizou IF para localizar alpha-SMA com EpCAM e CD3 com EpCAM em fragmentos tumorais e assembloides correspondentes. Os métodos publicados descrevem fixação, bloqueio e permeabilização, incubação com anticorpos, anticorpos secundários fluorescentes, contracoloração nuclear, imagem confocal e revisão de imagens.
Resultados. Dentro dos modelos do estudo e das amostras testadas, a coloração H&E apoiou a comparação de características histológicas selecionadas, enquanto a IHC e a IF mostraram a distribuição de marcadores epiteliais, estromais e associados ao sistema imunitário previamente definidos. Os diferentes painéis de imagem contribuíram com evidências complementares em vez de uma única medida de fidelidade universal.
Conclusão. O caso ilustra o valor de planear H&E, IHC e IF em torno de um mapa de comparação. Também mostra o limite da evidência: as imagens suportam conclusões sobre as estruturas e marcadores testados nas condições reportadas, não a equivalência completa de cada característica biológica e não o desempenho em outro sistema de organoides.
Referências:
- Dekkers JF, Alieva M, Wellens LM, et al. Imagens 3D de alta resolução de organoides fixos e transparentes. Protocolos da Natureza. 2019;14(6):1756-1771.
- Beşikcioğlu HE, Yurteri Ü, Ye L, et al. Protocolo para coloração por imunofluorescência em montagem total de organoides pancreáticos inervados embebidos em gel de ECM. Protocolos STAR. 2024;5(2):103132.
- Martinez-Ordoñez A, Cid-Diaz T, Duran A, Han Q, Moscat J, Diaz-Meco MT. Coloração em montagem total de organoides de câncer colorretal de rato e co-culturas de fibroblastos-organoides. Protocolos STAR. 2023;4(2):102243.
- Kim D, Lim H, Youn J, Park T-E, Kim DS. Produção escalável de organoides uniformes e maduros numa membrana permeável com geometria engenheirada em 3D.. Comunicações da Natureza. 2024;15:9420.
- Bouchard G, Zhang W, Ilerten I, et al. Um quadro quantitativo de colocalizações espaciais entre células que permite comparações entre assembloides in vitro e espécimes patológicos.. Comunicações da Natureza2025;16:1392.
- Zhang Y, Hu Q, Pei Y, et al. Um modelo de assembloide de cancro do pulmão específico do paciente com microambientes tumorais heterogéneos.. Comunicações da Natureza2024;15:3382.